生物安全操作规范

一、操作准则

1. 实验室应保持清洁整齐，严禁摆放和实验无关的物品。

2. 发生具有潜在危害性的材料溢出以及在每天工作结束之后，都必须清除工作台面的污染。在每一阶段工作结束后，必须采用适当的消毒剂清除工作区的污染。

3. 所有受到污染的材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前，必须清除污染。

4. 严禁用口吸移液管。

5. 所有的技术操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。避免在本生灯的明火上加热所引起物质爆溅。最好使用不需要再进行消毒的一次性接种环。

6. 如果窗户可以打开，则应安装防止节肢动物进入的纱窗。

7. 需要带出实验室的手写文件必须保证在实验室内没有受到污染。

二、废弃物处理

废弃物处理的首要原则是所有感染性材料必须在实验室内清除污染、高压灭菌或统一送至指定专业机构处理。

应在每个工作台上放置盛放废弃物的容器、盘子或广口瓶，最好是不易破碎的容器（如塑料制品）。当使用消毒剂时，应使废弃物充分接触消毒剂（即不能有气泡阻隔）。

三、生物安全柜的使用

1. 生物安全柜运行正常时才能使用。

2. 生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板。

3. 安全柜内应尽量少放置器材或标本，不能影响后部压力排风系统的气流循环。

4. 安全柜内不要使用明火，否则燃烧产生的热量会干扰气流并可能损坏过滤器。允许使用微型电加热器，但最好使用一次性无菌接种环。

5. 所有工作必须在工作台面的中后部进行，并能够通过玻璃观察挡板看到。

6. 尽量减少操作者身后的人员活动。

7. 操作者不应反复移出和伸进手臂以免干扰气流。

8. 不要使实验记录本﹑移液管以及其他物品阻挡空气格栅，因为这将干扰气体流动，引起物品的潜在污染和操作者的暴露。

9. 工作完成后以及每天下班前，应使用适当的消毒剂对生物安全柜的表面进行擦拭。

10. 在安全柜内的工作开始前和结束后，安全柜的风机应至少运行5min。

11. 在生物安全柜内操作时，不能进行文字工作。

四、避免感染性物质的食入以及与皮肤和眼睛的接触

1. 微生物操作中释放的较大粒子和液滴（直径大于5μm）会迅速沉降到工作台面和操作者的手上。实验室人员在操作时应戴一次性手套，并避免触摸口、眼及面部。

2. 不能在实验室内饮食和储存食品。

3. 在实验室里时，嘴里不应有东西——钢笔、铅笔、口香糖。

4. 不应在实验室化妆。

5. 在所有可能产生潜在感染性物质喷溅的操作过程中，操作人员应将面部、口和眼遮住或采取其他防护措施。

五、血清的分离

1. 只有经过严格培训的人员才能进行这项工作。

2. 操作时应戴手套以及眼睛和黏膜的保护装置。

3. 规范的实验操作技术可以避免或尽量减少喷溅和气溶胶的产生。血液和血清应当小心吸取，而不能倾倒。严禁用口吸液。

4. 移液管使用后应完全浸入适当的消毒液中。移液管应在消毒液中浸泡适当的时间，然后再丢弃或灭菌清洗后重复使用。

5. 带有血凝块等的废弃标本管，在加盖后应集中送交专业机构处理。

6. 应备有适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出标本。

六、匀浆器、摇床、搅拌器和超声处理器的使用

1. 在使用匀浆器、摇床和超声处理器时，容器内会产生压力，含有感染性物质的气溶胶就可能从盖子和容器间隙逸出。由于玻璃可能破碎而释放感染性物质并伤害操作者，建议使用塑料容器，尤其是聚四氟乙烯（polytetrafluoroethylene，PTFE）容器。

2. 使用匀浆器、摇床和超声处理器时，应该用一个结实透明的塑料箱覆盖设备，并在用完后消毒。

3. 操作结束后，应在生物安全柜内打开容器。

4. 应对使用超声处理器的人员提供听力保护。

七、组织研磨器的使用

1. 拿玻璃研磨器时应戴上手套并用吸收性材料包住。塑料（聚四氟乙烯）研磨器更加安全。

2. 操作和打开组织研磨器时应当在生物安全柜内进行。

八、冰箱与冰柜的维护和使用

1. 冰箱、低温冰箱和干冰柜应当定期除霜、清洁和消毒，应清理出所有在储存过程中破碎的安瓿和试管等物品。清理时应戴厚橡胶手套并进行面部防护，清理后要对内表面进行消毒。

2. 储存在冰箱内的所有容器应当清楚地标明内装物品的科学名称、储存日期和储存者的姓名。未标明的或废旧物品应当高压灭菌并丢弃。

3. 应当保存一份冻存物品的清单。

4. 除非有防爆措施，否则冰箱内不能放置易燃溶液。冰箱门上应注明这一点。

九、洗手／清除手部污染

处理生物危害性材料时，只要可能均必须戴合适的手套。但是这并不能代替实验室人员需要经常地、彻底地洗手。处理完生物危害性材料和动物后以及离开实验室前、使用卫生间前后、进食或吸烟前、均必须洗手。大多数情况下，用普通的肥皂和水彻底冲洗对于清除手部污染就足够了。但在高度危险的情况下，建议使用杀菌肥皂。手要完全抹上肥皂，搓洗至少10 秒钟，用干净水冲洗后再用干净的纸巾或毛巾擦干（如果有条件，可以使用暖风干手器）。推荐使用脚控或肘控的水龙头。如果没有安装，应使用纸巾或毛巾来关上水龙头，以防止再度污染洗净的手。如上所述，如果没有条件彻底洗手或洗手不方便，应该用酒精擦手来清除双手的轻度污染。

十、溢出清除程序

当发生感染性或潜在感染性物质溢出时，应采用下列溢出清除规程：

1. 戴手套，穿防护服，必要时需进行脸和眼睛防护。

2. 用布或纸巾覆盖并吸收溢出物。

3. 向纸巾上倾倒适当的消毒剂，并立即覆盖周围区域（通常可以使用5%漂白剂溶液）。

4. 使用消毒剂时，从溢出区域的外围开始，朝向中心进行处理。

5. 作用适当时间后（例如30 min），将所处理物质清理掉。如果含有碎玻璃或其他锐器，则要使用簸箕或硬的厚纸板来收集处理过的物品，并将它们置于可防刺透的容器中以待处理。

6. 对溢出区域再次清洁并消毒（如有必要，重复第2～5步）。

7. 将污染材料置于防漏、防穿透的废弃物处理容器中。

8. 在成功消毒后，通知主管部门目前溢出区域的清除污染工作已经完成。