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动物模型详细方法第十七期|阿尔茨海默症动物模型(下)
发布时间:2025-11-23 发布者: 浏览次数:

动物模型详细方法第十七期|阿尔茨海默症动物模型(下)

ScienceBench Science Bench
2025年10月16日 20:42
阿尔茨海默症小鼠行为学验证的方法很多,今天介绍两种:Morris水迷宫测试和避暗实验。

1、Morris水迷宫测试

Morris水迷宫中黑色水池直径150cm,高60cm。方形透明平台(10×10×28cm)或圆形透明平台(直径8cm)。圆桶中注入45cm高的自来水,平台位于水面下1cm。水温维持在20-22°C,水中加入黑色无毒染料进行混匀使平台隐蔽。

  • 实验将水面等分为4个象限,其中一个象限为目标象限。水池上的视频采集系统同步记录小鼠游泳轨迹,并以ANY-maze行为学分析软件分析。实验开始前1天小鼠置于水迷宫实验室以适应周围环境。

  • 每天测试4次,均从不同的象限入水。每轮实验将小鼠从设定的入水点面向池壁放入水中。如果60s内实验小鼠爬上隐蔽站台,并在站台上停留时间超过5S,视为找到平台。

  • 从入水到寻台成功的时间记录为逃避潜伏期。如果小鼠在60s内没有寻找到平台,将会引导其至平台上并驻留10s,逃避潜伏期记录为60s。计算每天4次逃避潜伏期的平均值为平均逃避潜伏期。

  • 在第6天的空间探索实验中,水下的平台被撤去,选择平台对面的象限作为入水点,记录小鼠在60s内穿越原平台位置的次数为穿越平台次数,作为反映小鼠空间记忆能力的指标。


数据分析

使用追踪系统记录的数据进行统计分析,包括潜伏期、停留时间等。通过比较不同实验组的表现来评估空间学习和记忆能力的差异。

参考数值(仅供参考):

小鼠水迷宫直径:120厘米

大鼠水迷宫直径:160厘米


2、避暗实验

避暗实验是利用小鼠有很强的探究行为,喜暗恶光的习性。避暗箱包括左右两个同等大小的隔室,暗箱一侧的栅栏地板与刺激器相联,并可给予电击。明箱一侧则不与刺激器相联,故没有电流通过。小鼠进入暗箱即受到电击。

避暗实验分为三个阶段。(1)适应期:每只小鼠放进明箱后先适应5min,暗箱不通电,可在明暗箱之间自由活动。(2)训练期期间,小鼠(四肢)完全进入暗箱后,立即将中门关上,并给予一次电击。电击后让小鼠在暗箱内停留10s,使小鼠形成暗箱与电击之间的联系。将实验小鼠放回原笼,清洁操作箱。(3)记忆保持测试期,小鼠电刺激训练结束1h和24h后,小鼠放回明箱,中门打开,不给电击。

避暗潜伏期:小鼠第一次进入暗箱并被电击的时间。3min内未进入暗室的小鼠其潜伏期按180s。计算潜伏期越长,反映动物记忆越好。避暗错误次数:3min内,小鼠总共进入暗箱并被电击的次数。

参考文献

  1. MorrisR(1981).Spatial localization does not require the presence of local cues. Journal of Neuroscience Methods, 4(2), 195-201.

  2. VorheesC.V.,&Williams,M.T.(2o06).Morris water maze:procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nature Protocols,1(2),848-858.

  3. D'HoogeR.,&DeDeyn,P.P(2001).Applications of the Morriswatermazeinthe study of learning and memory. Brain Research Reviews,36(1),60-90

  4. ShojiH.,&Miyakawa,T.(20o1).Age-related behavioral changes from young to old age in male mice of a C57BL/6J strain maintained under a genetic stability program.Neurobiology of Aging, 22(4), 647-654.



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