微生物实验室样本分离操作规程
标本处理、检验与结果报告：
1)拭子、分泌物标本 标本涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后
置35℃温箱培养。
培养第24、48 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则
报告未培养出普通致病细菌。
2)尿液标本 取5ml 尿液,3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、
麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。
培养第24、48 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则
报告未培养出普通致病细菌。
3)引流液 标本3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、麦康凯平
板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。
培养第24、48 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则
报告未培养出普通致病细菌。
4)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌
接种环画线分离后置35℃温箱培养。
培养第24、48 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则
报告未培养出普通致病细菌。
5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于普通血平板、麦康凯平板成原始
线，再以无菌接种环画线分离后置35℃温箱培养。
培养第24、48 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则
报告未培养出普通致病细菌。
6)留置针头、小导管等标本 标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35℃温箱培养48 小时观察培
养液有无混浊，采样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35
℃温箱培养。
培养第24、48 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则
报告未培养出普通致病细菌。
真菌培养阴性操作程序
1、仔细查对标本标签与检验单是否正确，标本质量是否合格，若收检标本与检验单查对正确，
标本质量合格则进行接收检验，否则查找原因并在有关记录本上记录。
2、标本处理、检验与结果报告：
1)拭子、分泌物标本 标本涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃
温箱培养。
培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则
报告未培养出真菌。
2)尿液标本 取5ml 尿液,3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于TTC-沙保罗
平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。
培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则
报告未培养出真菌。
3)引流液 标本3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于TTC-沙保罗平板成原始
线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。
培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则
报告未培养出真菌。
4)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画
线分离后置25℃温箱培养。
培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则
报告未培养出真菌。
5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以
无菌接种环画线分离后置25℃温箱培养。
培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则
报告未培养出真菌。
6)留置针头、小导管等标本 标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35℃温箱培养48 小时观察培
养液有无混浊，采样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25℃温箱培
养。
培养第24、48、72 小时观察平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则
报告未培养出真菌。
苛养菌培养阴性操作程序
1、仔细查对标本标签与检验单是否正确，标本质量是否合格，若收检标本与检验单查对正确，
标本质量合格则进行接收检验，否则查找原因并在有关记录本上记录。
2、标本处理、检验与结果报告：
1)拭子、分泌物标本 标本涂于普通血琼脂平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始线，再以无菌
接种环画线分离后置C02 缸，35℃温箱培养。
培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，
则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。
2)尿液标本 取5ml 尿液,3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、
巧克力(含V、X 因子)平板成原始线，再画线分离后置C02 缸，35℃温箱培养。
培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，
则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。
3)引流液 标本3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样画线分离接种普通血平板、
巧克力(含V、X 因子)平板，置C02 缸，35℃温箱培养。
培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，
则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。
4)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板原始线，
再画线分离后置C02 缸， 35℃温箱培养。
培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，
则报告未培养出肺炎球菌、嗜血杆菌等苛养菌。
5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于血平板、布氏血平板成原始线，
再分离画线后置于C02 缸，放入35℃温箱培养。另取约1g 标本接种碱性蛋白胨水中，35℃温
箱培养24-72 小时，再转种高盐平板、中国兰平板、山梨醇麦康凯平板。
培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，
则报告未培养出弧菌、螺杆菌等细菌。
6)留置针头、小导管等标本 标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35℃温箱培养48 小时观察培
养液有无混浊，采样转种血平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始线，再画线分离后置于C02
缸，35℃温箱培养。
培养第24、48、72 小时观察各平板上有否出现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，
则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。
抗酸培养阴性操作程序
1、仔细查对标本标签与检验单是否正确，标本质量是否合格，若收检标本与检验单查对正确，
标本质量合格则进行接收检验，否则查找原因并在有关记录本上记录。
2、标本处理、检验与结果报告：
液性引流标本(如腹水、尿液、CSF 等)直接离心留沉淀物，杂菌污染标本(如大便、痰等)取样置
无菌管，加入1N NaOH1ml 作用30 分钟，再加入1N HCl1ml 中和，3000 转/分钟离心5 分钟，
取沉淀物100μl 量接种罗氏培养基，置37℃温箱培养。
每星期观察一至两次培养基斜面，结果连续观察七个星期以上未发现有可疑菌落生长，报告未培
养出分枝杆菌。
支原体培养检验操作程序
