油红O是一种脂溶性的偶氮染料，是很强的脂溶性试剂和脂肪染色剂，能特异性的使细胞或组织内甘油三酯等中性脂质等染色，而对磷脂和胆固醇的染色较弱。当细胞或组织切片浸入油红O染色液时，油红O溶于细胞或组织内的脂肪(如脂滴)中，使其呈红色或橙红色。由于油红O观察性更好，染色清晰、鲜明，目前已广泛替代了其它脂肪染色法，如苏丹III、IV染色法等。
油红O用于病理状态下组织脂肪的检测，包括以下几个方面：a. 正常情况下，除脂肪细胞外其它细胞内一般不见或仅见少量脂滴，在病理或特定生理状态下这些细胞中出现脂滴或脂滴明显增多，特别是在肝、心、肾等实质器官发生脂肪变性时，胞浆内出现大小不一的空泡样结构，这时需用油红O染色鉴定该空泡样结构是否为脂滴积累所导致的脂肪变性；b. 在动脉粥样硬化检测时，可显示内皮细胞下的脂质沉积；c. 在脂肪栓塞检测时，显示脂肪栓塞栓子内的脂质；d. 在肿瘤组织的鉴别诊断时，由脂肪组织所发生的肿瘤在与其它组织来源的肿瘤相区分时，可以借助油红O鉴定是否为脂肪组织所发生的肿瘤，脂肪组织的油红O染色为阳性。
对于细胞样品：
【对于贴壁不太好的细胞，加入任何溶液时，不宜直接将溶液加到细胞上，而应沿着孔板壁缓慢加入，然后轻轻混匀，这样可以避免将在加入溶液时使细胞漂浮起来。】
2.加入10%多聚甲醛固定30min，PBS洗三次【样品固定时，不可用醇类或丙酮等可以溶解脂肪的固定液】
3.油红O染色30min（避光），PBS洗三次，观察
【油红O工作液的配置：油红O储存液（300mg油红O粉末溶于100mL99%异丙醇中，室温保存并避光），按照油红O储存液与超纯水（3：2）稀释，滤膜过滤，现用现配，并注意避光】
【油红O溶液是饱和溶液，在室温放置一段时间或4℃保存时，可能会有少量沉淀析出，同时，为了避免异丙醇的挥发，需要现用现配】
【染液体积均匀覆盖到细胞即可，可以适当延长染色时间，但不宜超过60min】 
