MTT（噻唑蓝）
1.黄色或橙黄色粉末，微溶于甲醇，难溶于水，易溶于DMSO2.常配置成5mg/mL的储备液(0.5gMTT溶解在100mLPBS中)，使用0.22μm的滤头过滤除菌
基本原理：
1.活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒，沉积在活细胞中2.DMSO可以溶解甲瓒，490nm测吸光度，反映活细胞数量
主要用途：
1.DMSO可以直接溶解，无需配制，使用方便，溶解速度快，但对人体毒性较大，且需去除原培养液，在去除培养液的过程中，可能会把结晶去掉，导致结果不稳定
2.避免血清干扰，高浓度血清会影响吸光度值
3.MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，不能确定细胞绝对数，用酶标仪检测结果时，为了保证实验结果的线性，MTT吸光度最好在0-0.7之间
4.选择适当的细胞接种密度与培养时间，细胞数太多敏感性降低，太少观察不到差异
6.现用现配，过滤后在4℃避光保存两周，-20℃长期保存，避免反复冻融
操作步骤：
1.收集对数期细胞，铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，边缘孔用无菌PBS填充。【因为边缘的32孔中水分蒸发很快，药物易被浓缩，对实验影响大。同时加入pbs液填充后，可以一定程度上保持中间孔的水分】2. 5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）,加入浓度梯度的药物,一般5-7个梯度,设3-5个复孔，否则难以反应真实情况3. 5%CO2，37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。4. 弃去培养液，用PBS冲2-3遍后，再加入含MTT的培养液。【防止MTT与药物反应，一些具有氧化还原性的药物，比如谷胱甘肽、维生素等，可能会将MTT还原成棕褐色沉淀】6. 每孔加入150ul二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值。7. 同时设置调零孔（培养基、MTT、二甲基亚砜），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜）8.处理数据（推荐使用graphpad、origin等）
