导语： 心肌梗死及其后再灌注治疗所引发的损伤，是心血管研究领域的热点。构建稳定可靠的动物模型是开展相关研究的第一步。今天，我们就来详细拆解一下经典的小鼠左冠状动脉前降支（LAD）结扎术，教你如何一步步构建MI和I/R模型。收藏这一篇，实验成功率大大提升！
一、模型原理简介
顾名思义，这个模型的核心就是通过结扎心脏的左冠状动脉前降支（LAD），人为地制造心肌缺血。
二、实验前准备
1. 实验动物：
2. 主要仪器与试剂：
麻醉剂： 1-2% 异氟烷（吸入麻醉）或 戊巴比妥钠（腹腔注射）
ventilator（动物呼吸机）：至关重要，保证手术过程中小鼠正常呼吸。
手术器械： 精细剪刀、镊子、持针器、7-0或8-0无菌缝合线、开胸器、加热垫。
其他： 碘伏消毒液、生理盐水、棉签、剃毛器、心电图（ECG）仪（可选，用于实时监测）。
3. 术前准备：
三、手术操作步骤（图文关键点）
第一步：气管插管与呼吸机连接
在颈部正中做一微小切口，分离肌肉暴露气管。
小心地将一根24G静脉导管插入气管，确认插入后，迅速连接到呼吸机上。
设置呼吸机参数（潮气量：0.8-1.2 ml，呼吸频率：110-120次/分钟），确保胸廓起伏规律。
小贴士： 气管插管是手术成败的关键之一，操作需迅速准确，避免损伤喉部。
第二步：开胸与心包切除
在左侧第3、4肋间区域，用剪刀斜切开一个约1cm的切口。
用开胸器轻轻撑开肋间隙，暴露心脏。
用精细镊子小心地撕开心包膜，清晰暴露左心室和左心房，可以看到LAD血管（通常位于左心耳下缘与肺动脉圆锥之间）。
第三步：冠状动脉结扎
用7-0或8-0的无损伤缝合线，在LAD起始部下约2-3mm处进针。
将一小段PE管（约1-2mm）置于血管与线之间，然后打一个活结（用于I/R模型）或死结（用于MI模型）。
成功缺血标志： 结扎后立即观察左心室前壁区域会变得苍白，搏动减弱，心电图ST段显著抬高（如果连接了ECG）。这表明结扎成功。
第四步：区分MI与I/R模型
第五步：术后复苏与护理
断开呼吸机，等待小鼠自主呼吸恢复后，小心拔出气管插管。
将小鼠置于37℃加热垫上保温，直至完全清醒。
连续3天皮下注射镇痛药（如布普renorphine，0.1mg/kg）和抗生素（如青霉素），减轻动物痛苦并预防感染。
提供软食和饮水，密切观察状态。
四、模型成功性验证
存活率： 熟练操作后，术后24小时存活率应>80%。
心电图： 术后持续监测可见病理性Q波、ST-T段改变。
心脏超声： 术后1-4周进行超声检查，可评估心功能（EF、FS值显著下降）和梗死区室壁运动异常。
TTC染色： 处死动物后取心脏进行TTC染色，梗死区域呈苍白色，而非梗死区呈砖红色，可定量计算梗死面积。
组织学染色： HE染色观察心肌细胞坏死、炎症浸润；Masson染色观察胶原沉积（纤维化）。
五、常见问题与注意事项
死亡率高： 主要原因可能是气管插管失败、气胸、出血过多或结扎位置不对。勤加练习是唯一途径。
梗死面积不稳定： 结扎位置LAD的解剖变异是主要原因。尽量保证所有小鼠结扎位置的一致性。
动物福利： 务必做好术后镇痛和护理，这是伦理要求和获得稳定数据的保障。
假手术组： 对照组需进行假手术（即完成所有步骤但不结扎LAD），以排除手术创伤本身的影响。
结语
构建稳定的小鼠MI/I/R模型需要精细的操作和丰富的经验。希望这篇详细的教程能为大家的科研之路提供帮助！从第一步开始耐心练习，你一定能掌握这项核心技术。
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